相差生物顯微鏡和熒光生物顯微鏡觀察支原體

支原體是一類尺寸介乎細菌和病毒之間的原核細胞型病原微生物，沒有細胞壁，形態(tài)多樣，一般致病性弱，主要黏附在細胞膜上獲取營養(yǎng)，損傷細胞膜，影響細胞正常生命活動，進而引起泌尿系統(tǒng)感染、沙眼、肺炎等疾病。支原體直徑為0.2~0.3μm，結(jié)構(gòu)簡單，球形，具有較大的可變性，使用光學(xué)顯微鏡高倍相襯觀察，如果看到細胞核周圍大量靜止或布朗運動的小黑點，可以推斷大概率為支原體。以下是使用相差生物顯微鏡和熒光生物顯微鏡觀察支原體的具體方法：

一、相差顯微鏡觀察

生物顯微鏡MHL2800

相差顯微鏡能夠觀察活細胞和未染色的標本，可以觀察到支原體呈暗色微小顆粒，有類似布朗運動的表現(xiàn)，在細胞表面或細胞之間游離或成群分布的形態(tài)和排列方式。支原體與細胞破碎后溢出的細胞內(nèi)容物如線粒體等頗相似，應(yīng)細加區(qū)別。

二、熒光顯微鏡觀察

熒光顯微鏡UB203i-FL

熒光顯微鏡觀察需要使用特殊的熒光染料或抗體對支原體進行標記，根據(jù)熒光反應(yīng)判斷是否感染。支原體屬于原核生物，可以使用DAPI等細胞核熒光染色劑染色，還可以使用相差熒光染料或抗體標記。一般來說，支原體感染的細胞在熒光顯微鏡下會呈現(xiàn)出綠色或紅色熒光，這取決于所使用的熒光染料和抗體。

應(yīng)用實例：在呼吸道九聯(lián)檢查中，包含支原體肺炎檢測。使用熒光顯微鏡觀察時，如果觀察到紅色細胞外圍出現(xiàn)明亮的綠色熒光反應(yīng)，且形態(tài)為明顯的細胞膜或者胞漿，則可以判定為陽性，這些綠色的熒光信號標記的就是肺炎支原體。相反，如果紅色細胞周圍無熒光或少量綠色熒光，且熒光較弱，則判定為陰性，這意味著樣本中未檢測到肺炎支原體。

三、觀察注意事項

支原體主要黏附在細胞膜上生存，沒有細胞壁，通常呈圓形或橢圓形，一般呈末端尖銳、表面有許多小突起的形態(tài)特征。

在觀察過程中，應(yīng)注意區(qū)分支原體與其他細胞結(jié)構(gòu)或污染物。

熒光顯微鏡觀察診斷支原體肺炎屬于血清學(xué)檢測，要等發(fā)病后4~7日，體內(nèi)產(chǎn)生免疫反應(yīng)才能檢測出來，主要適合首診檢測陰性，復(fù)診仍然懷疑肺炎支原體感染的情況。

通過相差顯微鏡和熒光顯微鏡的觀察，可以更深入地了解支原體的形態(tài)、分布和感染情況，為疾病的診斷和治療提供有力支持。